本指南旨在幫助北京市醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)管人員增強(qiáng)對(duì)無菌醫(yī)療器械相關(guān)知識(shí)的認(rèn)識(shí)，指導(dǎo)和規(guī)范全市醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)管人員對(duì)醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)滅菌工藝控制水平的監(jiān)督檢查工作，同時(shí)，為醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)（以下簡(jiǎn)稱生產(chǎn)企業(yè)）在滅菌工藝過程管理要求提供參考和依據(jù)。

　　當(dāng)國(guó)家相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、檢查要求發(fā)生變化時(shí)，或隨著滅菌技術(shù)和方法的不斷發(fā)展及實(shí)際情況的變化，應(yīng)重新對(duì)本指南進(jìn)行修訂。

　　一、適用范圍

　　本指南適用于北京市藥品監(jiān)督管理局組織、實(shí)施的《醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證》核發(fā)、變更、換證等現(xiàn)場(chǎng)檢查、醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系考核、醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范檢查、醫(yī)療器械生產(chǎn)日常監(jiān)督等各項(xiàng)涉及滅菌工藝的檢查。

　　目前已知的滅菌方法很多，根據(jù)滅菌方式的不同，醫(yī)療器械行業(yè)常用的滅菌方法有環(huán)氧乙烷滅菌（以下簡(jiǎn)稱EO滅菌）、輻照滅菌和濕熱滅菌等。本指南選擇目前北京市醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)普遍采用的EO滅菌和鈷60輻射滅菌進(jìn)行說明。

　　二、EO滅菌的檢查

　　EO滅菌過程的檢查應(yīng)在了解生產(chǎn)企業(yè)是否掌握滅菌知識(shí)和要求的基礎(chǔ)上，圍繞滅菌設(shè)備的管理、滅菌確認(rèn)及再確認(rèn)和日常滅菌活動(dòng)等情況開展，重點(diǎn)檢查生產(chǎn)企業(yè)實(shí)施滅菌過程控制及動(dòng)態(tài)監(jiān)視滅菌過程的情況。

　　（一）EO滅菌確認(rèn)的檢查

　　滅菌工藝的確認(rèn)是保證滅菌效果達(dá)到滅菌要求的重要步驟，也是生產(chǎn)企業(yè)日常對(duì)滅菌活動(dòng)進(jìn)行監(jiān)視控制的主要依據(jù)。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)在初次對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行滅菌前，對(duì)滅菌過程進(jìn)行確認(rèn)，確認(rèn)產(chǎn)品特性、滅菌器參數(shù)設(shè)置、工藝參數(shù)等。生產(chǎn)企業(yè)的滅菌工藝控制部門應(yīng)熟練掌握滅菌確認(rèn)過程的關(guān)鍵點(diǎn)和重要環(huán)節(jié)，確認(rèn)工作可與滅菌設(shè)備生產(chǎn)廠共同完成，但生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)全程參與滅菌確認(rèn)工作。

　　滅菌確認(rèn)工作的應(yīng)包括：輸入→策劃→確認(rèn)過程→確認(rèn)報(bào)告。

　　1、輸入應(yīng)包括：與產(chǎn)品有關(guān)的要求，如法規(guī)要求、顧客要求、產(chǎn)品無菌保證水平、產(chǎn)品的設(shè)計(jì)、包裝的設(shè)計(jì)、產(chǎn)品性能要求等。

　　2、策劃應(yīng)包括：建立滅菌確認(rèn)控制程序；具體的滅菌確認(rèn)方案或確認(rèn)計(jì)劃，如依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)；驗(yàn)證的時(shí)間、內(nèi)容、程序；人員（成立確認(rèn)工作小組并進(jìn)行資格審查）；提出確認(rèn)（合格）的標(biāo)準(zhǔn)。

　　3、滅菌確認(rèn)：（確認(rèn)過程應(yīng)符合下圖）

　?。?）試運(yùn)行必須證明，空載時(shí)預(yù)處理（如有）、滅菌和通風(fēng)設(shè)備符合設(shè)備規(guī)范要求。試運(yùn)行必須從校準(zhǔn)所有用于控制、指示和記錄滅菌過程的儀器開始。

　　試運(yùn)行文件應(yīng)包括安裝記錄和空載試運(yùn)行記錄。安裝記錄有設(shè)備供應(yīng)商資料（營(yíng)業(yè)執(zhí)照、生產(chǎn)許可證、醫(yī)療器械注冊(cè)證等）；設(shè)備資料（合格證、使用說明書、操作說明書、常見故障排除說明、出廠檢驗(yàn)報(bào)告、安裝位置圖、設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)說明等）；設(shè)備安裝記錄和計(jì)量器具校驗(yàn)記錄等?？蛰d試運(yùn)行應(yīng)對(duì)下列參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證：滅菌柜柜壁、空間溫度均勻性；預(yù)真空時(shí)達(dá)到真空的程度和速度；柜室的泄漏率(在負(fù)壓抽真空或抽真空，和在超過大氣壓力下進(jìn)行)；處理過程中加入蒸汽時(shí)壓力升高的程度；加入EO時(shí)壓力升高的程度和達(dá)到的速度，與用于監(jiān)測(cè)滅菌劑濃度的因素的相互關(guān)系；排除EO所需達(dá)到的真空程度和速度；通入空氣(或其他氣體)時(shí)壓力升高的程度和達(dá)到壓力的速度；以上后兩個(gè)階段重復(fù)的次數(shù)以及連續(xù)重復(fù)中的各種變化；有關(guān)輔助系統(tǒng)的性能，如所提供的蒸汽的質(zhì)量、滅菌劑氣化器達(dá)到最低氣體輸入溫度的能力、供給滅菌器經(jīng)過濾的氣和水的可靠性、在有最大量被滅菌物品的情況下蒸汽發(fā)生器持續(xù)保質(zhì)供汽的能力等。

　　試運(yùn)行應(yīng)進(jìn)行多次循環(huán)，以驗(yàn)證控制的重現(xiàn)性。

　?。?）物理性能鑒定應(yīng)包括：在規(guī)定預(yù)處理（如有）時(shí)間結(jié)束時(shí)，被滅菌物品處于預(yù)處理規(guī)范規(guī)定的溫度和相對(duì)濕度范圍內(nèi)；加入蒸氣時(shí)溫度與壓力升高的關(guān)系；向滅菌器室內(nèi)加入滅菌劑時(shí)，被滅菌物品的溫度和濕度在滅菌過程規(guī)范規(guī)定的范圍內(nèi)；氣體滅菌劑已經(jīng)加入滅菌器室內(nèi)；溫度和濕度及其他適用參數(shù)處于滅菌過程規(guī)范規(guī)定的范圍內(nèi)；在整個(gè)作用時(shí)間內(nèi)，被滅菌物品保持在規(guī)定的物理?xiàng)l件（包括EO濃度、壓力、濕度、溫度）下；在通風(fēng)過程中，被滅菌物品保持在規(guī)定的溫度范圍內(nèi)；通風(fēng)后EO和其反應(yīng)產(chǎn)物的殘留水平應(yīng)低于規(guī)定的限度。

　?。?）微生物性能鑒定必須通過對(duì)符合GB18281.1/ISO11138-1的生物指示物滅活，證明該滅菌過程適合產(chǎn)品滅菌。進(jìn)行生物學(xué)性能鑒定可使用存活曲線法、部分陰性法、半周期法等通用方法。在生物學(xué)性能鑒定過程中，應(yīng)利用試運(yùn)行和物理性能鑒定或取得結(jié)果確定需特別研究的某些關(guān)鍵特性。

　　生物指示物應(yīng)均勻地分布于被滅菌物品中，但放置點(diǎn)應(yīng)包括滅菌條件下最難滅菌的地方。用于生物學(xué)性能鑒定的生物指示物的數(shù)量應(yīng)能驗(yàn)證整個(gè)被滅菌物品的微生物滅活。通常進(jìn)行這類微生物試驗(yàn)宜采用以下生物指示物數(shù)量：滅菌器可用體積小于等于5m³時(shí)至少20個(gè)；滅菌器可用體積5m³至10m³時(shí)，每增加1m³應(yīng)增加2個(gè)生物指示物；滅菌器可用體積大于10m³時(shí)，每增加2m³應(yīng)增加2個(gè)生物指示物。

　?。?）上述滅菌確認(rèn)完成后，還應(yīng)對(duì)滅菌過程對(duì)產(chǎn)品其它性能（如化學(xué)性能、物理性能、生物相容性等）的影響進(jìn)行確認(rèn)，以確定該滅菌過程適宜于其產(chǎn)品。

　?。?）如需要重復(fù)滅菌的，還應(yīng)對(duì)重復(fù)滅菌情況進(jìn)行確認(rèn)，包括滅活確認(rèn)、其它性能確認(rèn)（如化學(xué)性能、物理性能、生物相容性等）。

　　4、確認(rèn)報(bào)告

　　生產(chǎn)企業(yè)編制的確認(rèn)報(bào)告至少應(yīng)包括：滅菌產(chǎn)品的詳細(xì)說明（包括包裝、滅菌器內(nèi)被滅菌物品的放置形式）；滅菌器的技術(shù)規(guī)格；試運(yùn)行數(shù)據(jù)；物理性能鑒定和生物學(xué)性能鑒定的全部記錄；進(jìn)行性能鑒定時(shí)所有儀表、記錄儀等經(jīng)過校準(zhǔn)的證明；復(fù)審和重新確認(rèn)的規(guī)定；確認(rèn)方案；所用程序的文件資料；所有人員的培訓(xùn)手冊(cè)和記錄；文件化操作規(guī)程，包括過程控制范圍；維護(hù)與校準(zhǔn)程序；確認(rèn)結(jié)論。

　　企業(yè)制定的滅菌工藝應(yīng)包括溫度、濕度、壓力、EO濃度和滅菌時(shí)間等滅菌工藝的主要技術(shù)性能指標(biāo)。以下給出的部分技術(shù)性能指標(biāo)參考值僅供檢查員參考，每個(gè)產(chǎn)品的具體滅菌工藝參數(shù)應(yīng)以企業(yè)的滅菌確認(rèn)結(jié)果為準(zhǔn)。

　?。?）滅菌溫度：滅菌溫度的常規(guī)極限通常在37℃-63℃，一般常用的合適溫度為50℃±5℃，當(dāng)溫度高到足以使藥物發(fā)揮最大作用時(shí)，再升高溫度，殺菌作用不再加強(qiáng)。滅菌溫度與產(chǎn)品的材料、物理化學(xué)性能，產(chǎn)品在滅菌柜中的擺放，產(chǎn)品包裝材料、大小、厚度、裝載數(shù)量有關(guān)。

　?。?）濕度：滅菌產(chǎn)品的含水量、微生物本身的干燥程度和滅菌環(huán)境的相對(duì)濕度，對(duì)EO的滅菌作用均有顯著的影響。應(yīng)保證滅菌室加濕效果具有在相對(duì)濕度≤40%時(shí)加濕到75%以上的能力；在抽真空后、加藥前，此時(shí)滅菌器內(nèi)的濕度應(yīng)控制30%RH-80%RH范圍內(nèi)。

　　（3）壓力：預(yù)真空的大小決定殘留空氣的多少，而殘留空氣可直接影響EO氣體、熱量、濕氣到達(dá)被滅菌物品的內(nèi)部，所以滅菌過程尤其是加濕前真空度對(duì)滅菌效果影響巨大。預(yù)真空度應(yīng)考慮以下因素的影響：對(duì)被滅菌物品及其包裝的影響；負(fù)壓滅菌與正壓滅菌；對(duì)濕度的影響；設(shè)定真空度與達(dá)到該真空度所需時(shí)間；真空持續(xù)時(shí)間（保壓）。

　?。?）EO濃度：300—1000mg/L是目前常用的EO濃度條件。企業(yè)選擇EO濃度應(yīng)考慮以下因素的影響：產(chǎn)品的裝載量、加入時(shí)所需時(shí)間及EO殘留量。

　　（5）滅菌時(shí)間：采用半周期法進(jìn)行微生物性能驗(yàn)證的，滅菌工藝規(guī)定的作用時(shí)間至少為半周期2倍。

　?。ǘ缇顒?dòng)的檢查

　　滅菌活動(dòng)是生產(chǎn)企業(yè)日常生產(chǎn)行為的一部分，其活動(dòng)過程應(yīng)按照滅菌確認(rèn)的結(jié)果開展，生產(chǎn)企業(yè)參與滅菌活動(dòng)的工作人員應(yīng)能熟練操作滅菌設(shè)備、明確滅菌設(shè)備工作的流程和熟知特殊情況下的處理措施。檢查員可以通過詢問或要求企業(yè)實(shí)際操作的方式對(duì)其進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)于滅菌設(shè)備操作人員的能力可以通過查閱生產(chǎn)企業(yè)的培訓(xùn)情況和實(shí)際操作的情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。

　　通常日常滅菌活動(dòng)應(yīng)包括：滅菌前準(zhǔn)備、滅菌實(shí)施、產(chǎn)品解析。企業(yè)的滅菌活動(dòng)的過程一般通過滅菌器打印的過程參數(shù)記錄反映，也可通過計(jì)算機(jī)編譯后的過程圖表等電子文檔方式反映。滅菌過程記錄應(yīng)至少包含滅菌產(chǎn)品名稱、滅菌產(chǎn)品批號(hào)、滅菌器的編號(hào)、操作人員、滅菌全過程工藝參數(shù)（如滅菌開始時(shí)間、投藥量、滅菌結(jié)束時(shí)間、壓力、濕度、溫度）等基本信息。

　　對(duì)于滅菌過程的控制，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)建立詳細(xì)的滅菌控制要求，包括：滅菌工藝規(guī)程、滅菌產(chǎn)品解析要求和滅菌設(shè)備使用維護(hù)規(guī)程。滅菌器是滅菌工藝中使用的主要設(shè)備，生產(chǎn)企業(yè)對(duì)滅菌器設(shè)備的控制文件至少應(yīng)包含設(shè)備調(diào)試、設(shè)備保養(yǎng)、設(shè)備維修、設(shè)備報(bào)廢處理等方面的內(nèi)容，設(shè)備的運(yùn)行記錄的留存應(yīng)與設(shè)備的使用壽命保持一致。

　?。ㄈ┊a(chǎn)品解析的檢查

　　對(duì)于EO滅菌的產(chǎn)品，除以上提到的檢查內(nèi)容外，還應(yīng)注意生產(chǎn)企業(yè)對(duì)EO殘留量的控制能力。檢查員可通過現(xiàn)場(chǎng)檢查產(chǎn)品解析庫(kù)、成品庫(kù)和查閱EO殘留量檢驗(yàn)記錄的方式對(duì)生產(chǎn)企業(yè)的控制水平進(jìn)行檢查。通常情況下，寬敞的場(chǎng)地（保證相鄰獨(dú)立大包裝間拉開距離）、良好的通風(fēng)條件（強(qiáng)排風(fēng)設(shè)備）和較長(zhǎng)的解析時(shí)間（14天以上）可以保證產(chǎn)品的解析效果符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

　　在沒有強(qiáng)制通風(fēng)措施的情況下，可采用自然解析法。自然解析法受自然環(huán)境條件（如季節(jié)）和產(chǎn)品擺放方式的影響很大，因此，對(duì)于采用自然解析法的，在EO殘留檢驗(yàn)時(shí)，企業(yè)應(yīng)確認(rèn)哪兒擺放的產(chǎn)品為最難解析的產(chǎn)品，并規(guī)定抽檢解析最差的樣品。

　　其中解析記錄應(yīng)包括：解析的產(chǎn)品批號(hào)（或滅菌批號(hào)）、解析開始時(shí)間、解析結(jié)束時(shí)間、解析的場(chǎng)所（當(dāng)解析庫(kù)有兩個(gè)以上時(shí)）、操作人姓名等。

　　三、鈷60輻射滅菌的檢查

　　由于目前國(guó)家對(duì)放射性元素使用的有關(guān)規(guī)定，國(guó)內(nèi)采用輻射滅菌的生產(chǎn)企業(yè)大都采取委托的形式開展滅菌活動(dòng)。因此，對(duì)此類滅菌活動(dòng)的檢查應(yīng)著重對(duì)生產(chǎn)企業(yè)是否了解輻照滅菌工作原理和監(jiān)視受托方滅菌過程參數(shù)的能力進(jìn)行評(píng)價(jià)。

　?。ㄒ唬┹椛錅缇_認(rèn)的檢查

　　生產(chǎn)企業(yè)的輻射滅菌確認(rèn)可與輻照滅菌單位共同完成，但生產(chǎn)企業(yè)的滅菌工藝控制部門必須全程參與確認(rèn)過程，并能清晰描述確認(rèn)流程。

　　1、滅菌確認(rèn)應(yīng)包括幾個(gè)組成部分：

　?。?）輻照裝置的安裝鑒定：鑒定文件中至少應(yīng)有輻照裝置的技術(shù)規(guī)格和參數(shù)、輻照裝置（源）位置的說明、傳輸系統(tǒng)有關(guān)的結(jié)構(gòu)和參數(shù)說明、輻照容器的尺寸、材料和結(jié)構(gòu)說明、操作輻照裝置和傳輸系統(tǒng)的說明、表明源活度測(cè)量日期的證書,時(shí)間計(jì)量設(shè)備的檢定證書；

　?。?）在已進(jìn)行安裝鑒定的輻照裝置中進(jìn)行產(chǎn)品運(yùn)行鑒定：運(yùn)行鑒定文件中至少應(yīng)有材質(zhì)均一產(chǎn)品的劑量分布實(shí)驗(yàn)報(bào)告,報(bào)告應(yīng)表明輻照時(shí)間與產(chǎn)品獲得吸收劑量之間關(guān)系及劑量不均勻度；

　?。?）在已鑒定合格的設(shè)備中，用指定的產(chǎn)品或模擬產(chǎn)品進(jìn)行性能鑒定：性能鑒定文件中至少應(yīng)有本產(chǎn)品的劑量分布實(shí)驗(yàn)報(bào)告,報(bào)告應(yīng)表明最大劑量/最小劑量值、區(qū)域和不均勻度,與產(chǎn)品規(guī)定的最大耐受劑量和最小滅菌劑量比較，確認(rèn)能夠滿足要求。在此之前，應(yīng)對(duì)滅菌過程對(duì)產(chǎn)品其它性能（如化學(xué)性能、物理性能、生物相容性等）的影響進(jìn)行確認(rèn)，以確定產(chǎn)品的最大耐受劑量。

　　（4）建立滅菌劑量：依照GB18280建立滅菌劑量，建立滅菌劑量試驗(yàn)報(bào)告中至少應(yīng)含有：初始污染檢測(cè)試驗(yàn)報(bào)告、初始污染檢測(cè)的回收率報(bào)告、驗(yàn)證劑量檢測(cè)報(bào)告、無菌試驗(yàn)報(bào)告以及無菌試驗(yàn)的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)報(bào)告；

　?。?）建立最大耐受劑量：依照GB/T19633完成包裝材料的滅菌過程確認(rèn)實(shí)驗(yàn)，確定包裝材料耐受的最大吸收劑量；

　?。?）如需要重復(fù)滅菌的，還應(yīng)對(duì)重復(fù)滅菌情況進(jìn)行確認(rèn)，包括滅活確認(rèn)、其它性能確認(rèn)（如化學(xué)性能、物理性能、生物相容性等）；

　?。?）審評(píng)和批準(zhǔn)文件化的質(zhì)量管理程序；

　?。?）支持保持確認(rèn)所進(jìn)行的活動(dòng)。

　　2、產(chǎn)品和包裝材料的選擇

　　生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)考慮輻照對(duì)產(chǎn)品（或產(chǎn)品組件）和包裝材料所產(chǎn)生的影響，應(yīng)證明產(chǎn)品經(jīng)輻射滅菌后在完整壽命周期內(nèi)的質(zhì)量、安全性和性能得到保證。企業(yè)在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)程序時(shí)應(yīng)考慮：工序、限度、輻射劑量、輻射源、原材料性能及貯藏環(huán)境的變化。

　　3、輻射劑量選擇

　　生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)獲悉產(chǎn)品上或產(chǎn)品中存在的自然微生物群體的數(shù)量和輻射抗力，以確定滅菌劑量。該劑量應(yīng)能達(dá)到預(yù)先選定的無菌保證水平（SAL）。選擇滅菌劑量時(shí)可利用生物負(fù)載信息或由增量劑量實(shí)驗(yàn)獲得的信息；也可在證明其適合性后選擇25kGy或15KGy作為滅菌劑量。生產(chǎn)企業(yè)還應(yīng)有計(jì)劃的定時(shí)監(jiān)測(cè)產(chǎn)品中存在的自然微生物群體數(shù)量以確定選定的滅菌劑量的有效性。

　　4、產(chǎn)品裝載模式的確定

　　生產(chǎn)企業(yè)對(duì)每種產(chǎn)品類型都應(yīng)建立其產(chǎn)品裝載模式。該裝載模式的技術(shù)規(guī)格應(yīng)制定下述文件：

　?。?）包裝產(chǎn)品的說明，包括尺寸、密度及在此參數(shù)中可接受的偏差，在需要時(shí)還有包裝內(nèi)產(chǎn)品的方位；

　　（2）在輻照容器內(nèi)產(chǎn)品裝載模式的說明；

　?。?）輻照容器機(jī)器尺寸說明。

　　5、產(chǎn)品劑量分布圖

　　劑量分布應(yīng)按指定裝載模式在產(chǎn)品裝載內(nèi)找出最小和最大劑量區(qū)域，并研究輻射的重復(fù)性。生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)將該信息用于常規(guī)輻射選擇劑量監(jiān)測(cè)位點(diǎn)。劑量分布測(cè)試應(yīng)在有足夠數(shù)量、有代表性的輻照容器內(nèi)進(jìn)行，以確定在輻照?qǐng)鲋刑幱诓煌恢玫妮椪杖萜髦g劑量分布的差異，特別在期望最大和最小劑量區(qū)及常規(guī)監(jiān)測(cè)位置的吸收劑量變化。企業(yè)應(yīng)對(duì)所有的裝箱模式和輻照加工中運(yùn)行的各途徑做劑量分布試驗(yàn)，用于輻射的產(chǎn)品通道也應(yīng)包括在該工作中。

　　（二）滅菌活動(dòng)的檢查

　　檢查員可通過詢問和查閱記錄的形式檢查生產(chǎn)企業(yè)整體滅菌控制水平，檢查記錄應(yīng)至少包含滅菌產(chǎn)品名稱、滅菌產(chǎn)品批號(hào)、輻射源的編號(hào)、輻射劑量及劑量計(jì)溯源證明、輻射開始時(shí)間、輻射結(jié)束時(shí)間、操作人員姓名等。

　　四、其它應(yīng)注意的問題

　　1、無論EO滅菌還是輻射滅菌，滅菌確認(rèn)都是保證滅菌效果的一項(xiàng)重要工作。所以為保證產(chǎn)品的滅菌效果，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)保證滅菌過程與滅菌確認(rèn)結(jié)果的一致性，檢查員也應(yīng)注意結(jié)合確認(rèn)的結(jié)果開展滅菌過程的檢查。

　　2、生產(chǎn)企業(yè)留存的滅菌確認(rèn)、滅菌過程、產(chǎn)品解析等各種原始記錄，應(yīng)能夠充分體現(xiàn)滅菌過程的實(shí)際參數(shù)，且保存時(shí)間應(yīng)至少不小于產(chǎn)品的壽命期，但從產(chǎn)品放行之日起不少于2年。

　　3、如允許對(duì)產(chǎn)品重復(fù)滅菌，則企業(yè)應(yīng)評(píng)價(jià)對(duì)產(chǎn)品和包裝的影響，并提供相應(yīng)的評(píng)價(jià)記錄及報(bào)告。

　　4、本指南中涉及的檢查方法，不僅限于在企業(yè)內(nèi)部完成的過程，如企業(yè)采用委托滅菌方式時(shí)，應(yīng)著重對(duì)生產(chǎn)企業(yè)在受托方過程控制中采用的監(jiān)視測(cè)量手段進(jìn)行評(píng)價(jià)。如必要，可依照本指南及《醫(yī)療器械產(chǎn)品委托滅菌方式檢查要點(diǎn)指南》在受托方進(jìn)行延伸檢查。

　　參考資料一：常見的名詞解釋

　　1、滅菌（sterilization）殺滅或除去特定環(huán)境或物品中一切微生物的過程。目前標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，滅菌過程必須使滅菌物品污染的微生物存活率減少到10^-6及以下。

　　2、滅菌劑（sterile agent）能夠殺滅特定外環(huán)境或物品中一切微生物（包括細(xì)菌繁殖體、芽孢、真菌、病毒、立克次體、原生動(dòng)物和藻類等）的化學(xué)物質(zhì)或其復(fù)方制劑。

　　3、微生物（microorganism）在顯微鏡下才能看到的微小實(shí)體，包括細(xì)菌、真菌、原生動(dòng)物和病毒。

　　4、生物指示物（biological indicator）對(duì)特定滅菌工藝有確定的抗力，可供使用的微生物檢驗(yàn)器材。

　　5、化學(xué)指示物（chemical indicator）根據(jù)暴露于某種滅菌工藝所產(chǎn)生的化學(xué)或物理變化，在一個(gè)或多個(gè)預(yù)定工藝參數(shù)上顯示變化的指示器材。

　　6、無菌保證水平（sterility assurance level，SAL） 滅菌后產(chǎn)品上存在單個(gè)活微生物的概率。

　　參考資料二：常用的滅菌方法介紹

　　常用滅菌的方法有兩類：物理方法和化學(xué)方法。物理方法有干熱滅菌、濕熱滅菌、射線滅菌、濾過滅菌等，化學(xué)方法有氣體滅菌、藥液滅菌等。

　　1、干熱滅菌法

　　干熱滅菌法可用于能耐受較高溫度，卻不宜被蒸汽穿透、或者易被濕熱破壞的物品的滅菌。

　　火焰滅菌法：是將待滅菌物品直接置于火焰中燒灼進(jìn)行滅菌的方法，滅菌迅速、可靠、簡(jiǎn)便。適用于：耐火焰材質(zhì)的物品如金屬、玻璃用具（接種針、接種環(huán)）或容器及瓷器等的滅菌。

　　干熱空氣滅菌法：是將待滅菌物品置于高溫干熱空氣中滅菌的方法，需要長(zhǎng)時(shí)間高熱環(huán)境才能達(dá)到滅菌效果。適用于：耐高溫材質(zhì)的物品（玻璃、金屬制品等）及耐高溫、不允許濕氣穿透的油脂類和粉末化學(xué)藥品。干熱空氣滅菌常用：135～145℃滅菌3～5小時(shí)；160～170℃滅菌2～4小時(shí)；180～200℃滅菌0.5～1小時(shí)。

　　2、濕熱滅菌法

　　濕熱滅菌法是通過熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。適用于：耐高溫、耐高壓蒸氣的物品。工作服、口罩、金屬或玻璃容器及用具、瓷器、橡膠塞、膜濾器、稀釋液等均能采用此法。

　　常用條件（溫度、蒸氣表壓與時(shí)間）為：115℃（67kPa），30min；121℃（97kPa），20min；126℃（139 kPa），15min。

　　影響濕熱滅菌的因素有：細(xì)菌的種類與數(shù)量、器械（被滅菌物）性質(zhì)、滅菌溫度、壓力與時(shí)間等。

　　3、射線滅菌法

　?。?）輻射滅菌法：原理是射線可直接破壞細(xì)菌DNA，導(dǎo)致微生物死亡。輻射滅菌的特點(diǎn)是不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強(qiáng)。適用于醫(yī)用敷料、無紡布手術(shù)衣、羊腸線、手術(shù)器械、乳膠手套和高分子材料等醫(yī)療器械的滅菌。

　?。?）紫外線滅菌法：是利用紫外線作用于菌體核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外光波長(zhǎng)190-350nm之間，其中波長(zhǎng)為260nm左右，對(duì)微生物的生物效應(yīng)最大。適用于：無菌室、某些工作區(qū)的空氣滅菌、物體表面滅菌。

　?。?）微波滅菌法：采用頻率300MHz～300kMHz的電磁波照射產(chǎn)生熱能殺滅微生物的方法。

　　4、濾過除菌法

　　濾過除菌法指用濾過方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機(jī)械除菌方法，供除菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液能順暢地通過，容易清洗，操作簡(jiǎn)便。適用于：對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等的除菌。常用除菌濾器（應(yīng)在無菌操條件下進(jìn)行）：0.22μm或0.3μm的微孔濾膜，G6垂熔玻璃濾器。

　　5、氣體滅菌法：指用化學(xué)藥品的氣體或蒸氣殺滅微生物的方法。常用氣態(tài)殺菌劑：為環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇、臭氧、乳酸、過氧乙酸等。

　　6、藥液滅菌法:藥液滅菌法利用藥液殺滅微生物的方法。常用的有0.1%～0.2%苯扎溴銨溶液，75%乙醇、2%煤酚皂溶液、1%聚維酮碘溶液等。
　　參考資料三：環(huán)氧乙烷滅菌原理

　　環(huán)氧乙烷（以下簡(jiǎn)稱EO）是一種最簡(jiǎn)單的環(huán)醚，低溫時(shí)為無色易流動(dòng)液體，沸點(diǎn)10.4℃，在該溫度以上為無色氣體。EO液體在室溫下易揮發(fā)，有醚味。EO殺滅微生物是由于它能與微生物的蛋白質(zhì)，DNA和RNA發(fā)生強(qiáng)烈的非特異性烷基化作用，可以與蛋白質(zhì)上的游離羧基（-COOH）、氨基(-NH2)、硫氫基(SH)和羥基(-OH)發(fā)生烷基化作用，造成蛋白質(zhì)失去反應(yīng)基團(tuán)，阻礙了細(xì)菌蛋白質(zhì)的正?；瘜W(xué)反應(yīng)和新陳代謝，導(dǎo)致微生物死亡。EO也可以抑制生物酶的活性。

　　EO滅菌是一種廣譜、高效和對(duì)滅菌物品無損害的氣體殺滅消毒劑。EO殺菌能力強(qiáng)且廣泛，可以殺滅病原微生物，包括細(xì)菌繁殖體、芽孢、病毒和真菌。蒸汽壓高，對(duì)消毒物品的穿透力強(qiáng)，適合于包裝物品的滅菌，可達(dá)到物品深部。

　　典型的滅菌工藝要經(jīng)過正壓過程和負(fù)壓過程：產(chǎn)品進(jìn)入滅菌器后關(guān)閉閘門，首先對(duì)滅菌室加溫，直到溫度達(dá)到預(yù)定的滅菌溫度；然后，滅菌室抽真空，當(dāng)達(dá)到預(yù)定的真空度后，開始對(duì)滅菌室加濕、加藥；在上述過程后，滅菌過程開始，滅菌計(jì)時(shí)器開始計(jì)時(shí)，在整個(gè)滅菌過程中需保持恒溫狀態(tài)；滅菌時(shí)間到達(dá)預(yù)設(shè)值，則開始對(duì)滅菌室進(jìn)行換氣，即用經(jīng)過過濾后的清潔空氣置換滅菌室內(nèi)的殘余EO氣體，將殘氣排出（通常通過水解對(duì)殘氣進(jìn)行處理），滅菌過程結(jié)束。

　　常見的EO滅菌器由滅菌箱體、輔助設(shè)備、監(jiān)測(cè)設(shè)備和控制裝置組成。滅菌箱體包括滅菌室、部件管路、密封材料、安全閥和門；輔助設(shè)備包括加熱及熱循環(huán)裝置、真空裝置、加濕裝置、加藥及氣化裝置、密封裝置和殘氣處理裝置等；監(jiān)測(cè)設(shè)備和控制裝置包括溫度傳感器、壓力傳感器、濕度傳感器和溫度指示器、壓力指示器、濕度指示器、計(jì)時(shí)器、記錄儀表及報(bào)警裝置。

　　參考資料四：環(huán)氧乙烷殘留

　　1、醫(yī)療器械產(chǎn)品如采用環(huán)氧乙烷（以下簡(jiǎn)稱EO）滅菌，應(yīng)不斷提高各類人員對(duì)EO殘留量造成健康風(fēng)險(xiǎn)的意識(shí)：EO能夠高效地對(duì)醫(yī)療產(chǎn)品進(jìn)行滅菌，在殺滅微生物的同時(shí)醫(yī)療產(chǎn)品上的EO殘留也會(huì)對(duì)使用者和患者的身體帶來一定的毒害。其毒性主要包括兩個(gè)方面：

　　一為EO本身的毒性。在很多情況下，EO是可致突變的，對(duì)胎兒可產(chǎn)生毒性并可致畸，對(duì)肇丸的功能具有副作用，并能損害體內(nèi)的許多器官系統(tǒng)。通過呼吸器官吸入體內(nèi)刺激呼吸道，引起惡心、嘔吐、頭昏、頭痛、嗜睡等癥狀。嚴(yán)重者可引起肺水腫；通過皮膚、粘膜接觸后，引起紅腫、水泡及血泡，嚴(yán)重者可出現(xiàn)局部皮膚燒傷及粘膜組織灼傷，造成毛發(fā)脫落；超量進(jìn)入人體血液內(nèi)，可致紅細(xì)胞溶解，補(bǔ)體滅活和凝血酶破壞引起全身性溶血。在動(dòng)物致癌研究中，吸人EO可產(chǎn)生幾種贅生性變化，包括白血病、腦腫瘤和乳房腫瘤。而當(dāng)食入或皮下注射EO時(shí)，則只在接觸部位形成腫瘤。

　　二是滅菌后生成物的毒性。EO與氯元素接觸產(chǎn)生毒性很大的氯醇，與水接觸形成乙二醇，對(duì)環(huán)境和種植物的生產(chǎn)起到很大的破壞作用。

　　2、經(jīng)EO滅菌的醫(yī)療器械應(yīng)采用透氣性好，有助于消除EO殘留的紙塑包裝，以最大限度地降低EO殘留，降低器械使用的風(fēng)險(xiǎn)。

　　產(chǎn)品滅菌后還必須按規(guī)定進(jìn)行解析，一般紙塑包裝滅菌后至少應(yīng)解析7天，全塑包裝滅菌后至少應(yīng)解析14天，并經(jīng)檢測(cè)確定器械上的EO殘留量小于10μg/g后方可出廠。

　　3、醫(yī)用敷料、無紡布、合成醫(yī)用乳膠手套等對(duì)EO氣體有很強(qiáng)的吸附性，吸附在這類產(chǎn)品上的殘留量很難徹底解析，所以對(duì)此類產(chǎn)品，一般不選用EO滅菌。

　　4、對(duì)每一種醫(yī)療器械，按接觸時(shí)間分類，其所允許釋放給患者的EO和2-氯乙醇（ECH）的最大日劑量應(yīng)不超過以下給出值。

　　——持久接觸器械（一次、多次或長(zhǎng)期使用、接觸器械超過30d）

　　EO對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過。.1mg/d。此外最大劑量:前24h不應(yīng)超過20mg;前30d不應(yīng)超過60mg;一生不應(yīng)超過2.5g。

　　ECH對(duì)患者的平均日荊量不應(yīng)超過2mg/d。此外最大劑量:前24h不應(yīng)超過12mg;前30d不應(yīng)超過60mg;一生不應(yīng)超過50g。

　　——長(zhǎng)期接觸器械（一次或多次使用、接觸器械超過24h，但不超過30d）

　　EO對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過2mg/d。此外最大劑量:前24h不應(yīng)超過20mg;前30d里不應(yīng)超過60mg。

　　ECH對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過2mg/d。此外最大劑量:前24h不應(yīng)超過12mg;前30d里不應(yīng)超過60mg。

　　——短期接觸器械（一次或多次使用、接觸器械不超過24h）

　　EO對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過20mg。

　　ECH對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過12mg。

　　——特殊情況

　　對(duì)多器械系統(tǒng)，應(yīng)對(duì)每單個(gè)器械規(guī)定限量。同時(shí)使用多個(gè)器械或器械用于新生兒會(huì)使作用加劇；眼內(nèi)透鏡上EO殘留量每只每天應(yīng)不超過0.5μg，每個(gè)透鏡不應(yīng)超過1.25μg；對(duì)血液氧合器和血液分離器，EO對(duì)患者的平均日劑量不應(yīng)超過60mg；對(duì)體外血液凈化裝置，上述長(zhǎng)期和短期分類中規(guī)定的EO和ECH的限量同樣適用，但允許超過EO一生劑量的限量。

　　5、EO殘留量測(cè)定方法

　?。?）比色分析法原理及測(cè)定方法

　　EO在酸性條件下水解生成乙二醇，乙二醇經(jīng)高碘酸氧化生成甲醛，甲醛與品紅－亞硫酸試液反應(yīng)生成產(chǎn)生紫紅色化合物，通過比色分析法可求得EO含量。

　　測(cè)定時(shí)，取乙二醇標(biāo)準(zhǔn)品適量，制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取不同體積的乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品供試液，測(cè)定吸光度。根據(jù)不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度值，繪制吸光度－體積標(biāo)準(zhǔn)曲線。取樣品適量，配制成樣品供試液，同法測(cè)定吸光度，以測(cè)得的吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。根據(jù)公式，計(jì)算出EO殘留量。

　　（2）氣相色譜法原理及測(cè)定方法

　　氣相色譜法系采用氣體為流動(dòng)相（載氣）流經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。物質(zhì)或其衍生物氣化后，被載氣帶入色譜柱進(jìn)行分離，各組分先后進(jìn)入檢測(cè)器，用記錄儀、積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號(hào)。

　　氣相色譜儀由載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣部分、色譜柱和檢測(cè)器的溫度均在控制狀態(tài)。在一定溫度下，用萃取劑－水萃取樣品中所含EO，用頂空氣相色譜法測(cè)定EO含量。

　　測(cè)定時(shí)，取EO標(biāo)準(zhǔn)品適量，制成六個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取10ml，制備六個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品試樣。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品試樣達(dá)到氣液平衡時(shí)，不同濃度的液體對(duì)應(yīng)于不同濃度的氣體，取平衡后的氣體，注入進(jìn)樣器，記錄EO的峰高（或面積）。根據(jù)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的峰高（或面積），繪制峰高（或面積）－濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。取樣品適量，配制成樣品試樣，同法測(cè)定峰高（或面積），以測(cè)得的峰高（或面積）從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。根據(jù)公式，計(jì)算出EO留量。

參考資料五：輻射滅菌工作原理

輻射加工是一個(gè)將產(chǎn)品暴露于電離輻射的物理過程。電離輻射滅菌是利用γ射線、X射線和電子束處理物品，殺死其中微生物的低溫滅菌方法。電離輻射可以直接作用于對(duì)生命有主要意義的大分子，使它們?nèi)绲鞍踪|(zhì)、核酸、酶等產(chǎn)生電離、激發(fā)或化學(xué)鍵斷裂，引起分子發(fā)生變化。而間接上，電離輻射作用于微生物體內(nèi)的水分子，可引起水的電離和激發(fā)，生成自由基，通過產(chǎn)生自由基和對(duì)生物起化學(xué)腐蝕作用的活性分子來破壞微生物。

電離輻射滅菌有滅菌徹底、節(jié)約能源、操作方便、宜于工業(yè)化連續(xù)操作等優(yōu)點(diǎn)。

參考資料六：參考標(biāo)準(zhǔn)

環(huán)氧乙烷滅菌：

——GB18279《醫(yī)療器械環(huán)氧乙烷滅菌確認(rèn)和常規(guī)控制》（ISO11135）

——GB18281.2《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物 第2部分：環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物》（ISO11138-2）

——YY0503 《環(huán)氧乙烷滅菌器》

輻射滅菌：

——GB18280《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌確認(rèn)和常規(guī)控制 輻射滅菌》（ISO11137）

——GB16383《醫(yī)療衛(wèi)生用品輻射滅菌消毒質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)》

——GB16352《一次性醫(yī)療用品γ射線輻射滅菌標(biāo)準(zhǔn)》

其他：

——GB/T19633《最終滅菌醫(yī)療器械的包裝》（ISO11607-1～2）

——GB18278《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌確認(rèn)和常規(guī)控制 要求工業(yè)濕熱滅菌》（ISO11134）

——GB/T14233.1《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法第1部分化學(xué)分析方法》

——GB/T16886.7《醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第7部分：環(huán)氧乙烷滅菌殘留量》（ISO10993-7）