根據(jù)《醫(yī)療器械注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理局令第16號）的要求并結(jié)合臨床化學體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品的特點，為規(guī)范臨床化學體外診斷試劑(盒)（以下簡稱試劑（盒））產(chǎn)品的技術(shù)審評工作，特制定本規(guī)范。

一、適用范圍

本規(guī)范適用于采用分光光度法原理，利用全自動、半自動儀器或分光光度計，在醫(yī)學實驗室進行臨床化學項目定量檢驗所使用的體外診斷試劑(盒)。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（試行）臨床化學體外診斷試劑（盒）管理類別為Ⅱ類。

二、技術(shù)審查要點

（一）試劑（盒）命名的原則

試劑（盒）名稱由三部分組成：第一部分：被測物質(zhì)的名稱；第二部分：用途；如測定試劑盒；第三部分：方法或原理。

例：葡萄糖測定試劑盒（葡萄糖氧化酶法）

（二）試劑（盒）的結(jié)構(gòu)組成

試劑（盒）的組成形式：單試劑，雙試劑，多試劑；

試劑盒的性狀：干粉或液體。

（三）工作原理

試劑（盒）通過各自不同的反應原理，最終以比色、免疫比濁或速率方法在具有分光光度系統(tǒng)的儀器上，利用Lamber-Beer定律，即物質(zhì)對單色光吸收的強弱與吸光物質(zhì)的濃度（c）和液層厚度 （b）間的關(guān)系的定律，對被測物質(zhì)進行定量分析。

（四）產(chǎn)品適用的相關(guān)標準

試劑（盒）適用以下相關(guān)標準：

1．GB/T 191-2008 包裝儲運圖示標志；

2．YY/T 0316-2008 醫(yī)療器械 風險管理對醫(yī)療器械的應用；

3．YY 0466-2003 醫(yī)療器械 用于醫(yī)療器械標簽、標記和提供信息的符號；

注：以上標準適用最新版本。

（五）產(chǎn)品的預期用途

試劑（盒）的預期用途應體現(xiàn)為對臨床樣本成分的定量測量。

（六）產(chǎn)品的主要技術(shù)指標

1、外觀

目測檢查，符合生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定的正常外觀要求。（一般要求試劑無雜質(zhì)、無絮狀物，外包裝完整無破損）。

2、凈含量

用通用量具測量，液體試劑的凈含量應不少于標示值。

3、試劑空白

3.1 試劑空白吸光度

用指定空白樣品測試試劑（盒），在測試主波長下，記錄測試啟動時的吸光度（A1）和約5分鐘(T)后的吸光度（A2），A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值，應符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

3.2 試劑空白吸光度變化率

對于速率法測試的試劑，用指定空白樣品測試試劑（盒），在測試主波長下，記錄測試啟動時的吸光度（A1）和約5分鐘(T)后的吸光度（A2），計算出吸光度變化值 ( )，即為試劑空白吸光度變化率（DA/min），應不超過生產(chǎn)企業(yè)給定值。。

4、分析靈敏度

試劑（盒）測試n單位被測物時，用已知濃度或活性的樣品測試試劑（盒），記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位吸光度差值（ΔA）或吸光度變化（ΔA/min）。應符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

5、線性范圍

用超出線性范圍上限濃度（活性）的樣品和超出或等于線性范圍下限濃度（活性）的樣品，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。分別測試試劑（盒），每個稀釋濃度測試3次，分別求出測定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（1）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

………………………………（1）

稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差或絕對偏差。

試劑（盒）線性范圍內(nèi)的分析性能應符合如下要求：

a) 線性相關(guān)系數(shù)r應≥0.990；

b) 線性偏差應不超過生產(chǎn)企業(yè)給定值。

注：線性偏差建議分段給出絕對偏差和相對偏差。

6、重復性

6.1批內(nèi)重復性

6.1.1試劑（盒）參考范圍為X1~X2區(qū)間濃度時，在重復性條件下，用高、中、低三個水平濃度（高、低濃度應超過參考區(qū)間20%～30%，中濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi)）的控制血清或新鮮人血清測試試劑（盒），重復測試至少10次（n≥10），分別計算測量值的平均值（ ）和標準差（s），計算變異系數(shù)（CV）。（變異系數(shù)，CV）不超過生產(chǎn)企業(yè)給定值。

6.1.2試劑（盒）參考范圍為0~X區(qū)間濃度時，在重復性條件下，用高、低兩個水平濃度（高濃度應超過參考區(qū)間20%～30%，低濃度水平在參考區(qū)間之內(nèi)）的控制血清或新鮮人血清測試試劑（盒），重復測試至少10次（n≥10），分別計算測量值的平均值（ ）和標準差（s），計算變異系數(shù)（CV）。（變異系數(shù)，CV）不超過生產(chǎn)企業(yè)給定值。

注：出廠檢驗時生產(chǎn)企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品特性對兩個濃度樣品進行檢驗。

6.2批內(nèi)瓶間差（干粉或凍干試劑適用）

用控制血清分別測試同一批號的20個待檢試劑（盒），并計算20個測量值的平均值（ 1）和標準差（s1）。

用控制血清對該批號的1個待檢試劑（盒）重復測試20次，計算結(jié)果均值（ 2）和標準差（s2）按公式（2）、（3）計算瓶間差的變異系數(shù)（CV）。

……………………………………（2）

……………………………………（3）

當s1＜s2時，令CV=0

試劑（盒）批內(nèi)瓶間差不超過生產(chǎn)企業(yè)給定值。

注：1）若一瓶試劑不能重復進行20次測試，則以該試劑的實際測量次數(shù)規(guī)定瓶間差的測量次數(shù)和瓶數(shù)。

2）出廠檢驗時批內(nèi)瓶間差可用同一批號10個待檢試劑（盒）進行測定。

6.3 批間差（三批試劑）

用控制血清分別測試3個不同批號的試劑（盒），每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值 (i=1,2,3)，按公式（4）、（5）計算相對偏差（R）。

……………………………………（4）

……………………………………（5）

式中：

中的最大值；

中的最小值。

試劑（盒）批間差應不超過生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定要求。

7、準確度

7.1相對偏差

用國家標準物質(zhì)或國際標準物質(zhì)或經(jīng)認可的參考測量實驗室使用相應的參考測量程序賦值的樣品(高、中、低三個濃度的人血清,可適當添加被測物，以獲得高濃度的樣品），對試劑（盒）進行測試，重復測定3次，取測試結(jié)果均值（M），按公式（6）計算相對偏差（B%）；

B%＝(M－T)／T×100%………………（6）

式中：M為測試結(jié)果均值；T為標準物質(zhì)標示值，或各濃度人血清定值。

7.2回收試驗

在臨床樣本中加入一定體積標準溶液（標準溶液體積與血清體積比應不大于1:20或其體積比不會產(chǎn)生基質(zhì)的變化，加入標準溶液后樣品總濃度必須在試劑（盒）測定線性范圍內(nèi)）或純品，每個濃度重復測定3次，按公式（7）計算回收率。

………………………………（7）

式中： R—回收率；

V—加入標準液體積；

V0—人血清樣品的體積；

C —人血清樣品加入標準液后的測定濃度；

C0—人血清樣品的測定濃度；

Cs—標準液的濃度。

試劑（盒）準確度應符合生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定要求。

7.3比對試驗

用不少于40個在測定濃度范圍內(nèi)不同濃度的臨床樣本，以制造商指定的分析系統(tǒng)作為比對方法，每份樣品按待測試劑（盒）操作方法及比對方法分別測定。用線性回歸方法計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)（r）及每個濃度點的相對偏差。

注：1）型式試驗時，建議按以上優(yōu)先順序，采用方法之一測試試劑（盒）的準確性。

2）出廠檢驗時，生產(chǎn)企業(yè)可以選擇以上檢驗方式，或用與選定校準品配套的質(zhì)控品進行準確性實驗，試驗方法自行確定。

8、穩(wěn)定性

8.1試劑（盒）在規(guī)定的貯存條件下保存至有效期末，產(chǎn)品的性能應符合線性和準確性的要求。

8.2干粉試劑開瓶后（復溶后）在規(guī)定的貯存條件下保存至預期時間內(nèi)，產(chǎn)品的性能應符合線性和準確性的要求。

（七）產(chǎn)品的臨床要求

試劑（盒）按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》（試行）及《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》進行臨床試驗。

執(zhí)行的基本原則至少包括以下幾個方面：

1、要有臨床機構(gòu)倫理委員會確認的文件；

2、在兩家省級醫(yī)療衛(wèi)生單位完成臨床研究； 3、新診斷試劑（盒）應與該診斷疾病的金標準針對臨床樣本進行盲法同步比較；“已有同種批準上市”的試劑（盒）應與已批準上市產(chǎn)品針對臨床樣本進行比對試驗。

4、臨床樣本的要求：綜合不同地區(qū)人種、流行病學背景、病原微生物的特性等因素選擇研究單位，癥狀典型和非典型的，一般臨床研究的總樣本數(shù)至少為200例，新診斷試劑（盒）1000例，

5、試劑（盒）變更申請中需進行臨床研究的方法：采用變更前試劑（盒）與變更后試劑（盒）進行比對試驗的方法，證明變更前后試劑（盒）達到變更前試劑(盒）的質(zhì)量水平。

（八）試劑（盒）說明書、標簽、包裝標識

——試劑（盒）說明書

試劑（盒）說明書應當符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求，審查要點為：

1．應有產(chǎn)品名稱，可包括通用名稱、商品名稱和英文名稱；

2．應說明試劑（盒）的包裝規(guī)格；

3．應詳細說明試劑（盒）的預期用途，如定量測定；

4．應說明檢驗原理；

5．應說明主要組成成份：對于產(chǎn)品中包含的試劑組份應有名稱、數(shù)量、每一組份中的主要成分在反應體系中的比例或濃度，如果對于正確的操作很重要、應提供其生物學來源、活性及其他特性；對于產(chǎn)品中不包含、但對該實驗必須的試劑組份，生產(chǎn)企業(yè)應列出此類試劑的名稱、純度，提供稀釋或混合方法及其他相關(guān)信息；對于試劑盒中含有校準品、質(zhì)控品，說明主要組成成份及其生物學來源，注明校準品的定值及其溯源性，注明質(zhì)控品的允許范圍。

6．應說明貯存條件及有效期；

7．應說明可適用儀器的型號；

8．應說明對樣本的要求，包括樣本采集過程中的注意事項，為保證樣本各組分穩(wěn)定所必需的抗凝劑或保護劑，已知的干擾物、能夠保證樣本穩(wěn)定的貯存、處理和運輸?shù)姆椒ǎ?/p>

9．應說明檢驗方法，至少包括試劑配制、試驗條件、校準程序、校準間隔、質(zhì)量控制程序、試驗結(jié)果的計算；

10．應有參考值范圍，并簡要說明確定的方法；（如參考人群、參考個體數(shù)量）

11.應有檢驗結(jié)果的解釋，說明可能對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素；

12.應說明檢驗方法的局限性

13.應說明產(chǎn)品性能指標，應符合注冊產(chǎn)品標準的要求；

14.應說明必要的注意事項，如本品僅用于體外診斷等，若該產(chǎn)品含有人源或動物源物質(zhì)，應給出具有潛在感染性的警告；

15.注明引用的參考文獻；

16.注明生產(chǎn)企業(yè)，包括企業(yè)名稱、地址（注冊地址和生產(chǎn)地址不同的應分別列出）、郵政編碼、電話和傳真號碼、網(wǎng)址；

17.注明醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證編號；

18.注明醫(yī)療器械注冊證書編號；

19.注明產(chǎn)品標準編號；

20.注明說明書批準日期及修訂日期。

—— 外包裝標簽

外包裝標簽上應有如下信息：

1.生產(chǎn)企業(yè)名稱和地址。

2.試劑（盒）名稱。

3.批號。如試劑（盒）包含不同批號的組件，外包裝的批號應能保證每個組件的批號可從生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)記錄中溯源。

4.規(guī)格。應包含體積或復溶后的體積。

5.預期用途。如試劑（盒）名稱不能反映試劑（盒）的預期用途，應提供簡要的預期用途說明。

6.體外診斷用途。應說明試劑的體外診斷用途。

7.儲存和處置條件。應提供在未開封狀態(tài)下可保證試劑、校準品和質(zhì)控物質(zhì)的穩(wěn)定狀態(tài)的必要儲存條件；應規(guī)定影響穩(wěn)定性的其他條件（如適用）；應規(guī)定產(chǎn)品處置時所采取的所有其他特殊措施（如適用）。

8.失效期。應明示在規(guī)定儲存條件下的失效期；失效期應以年、月，適當時以日表示；如僅給出年月，失效期應為指定月的最后一天；外包裝標簽上明示的失效期應為最早到期組件的失效期。

9.警告和預防措施。如體外診斷試劑（盒）被認為有危險性（例如：化學，放射性或生物危害性），外包裝應標有適當?shù)木疚ｋU的文字或符號，YY/T 0316的要求適用；對于化學危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當?shù)奈ｋU和安全性說明的使用說明，則應在外包裝的標簽上進行說明。

—— 初始包裝標簽

如初始包裝同時也是外包裝，則外包裝標簽的要求也適用。

初始包裝標簽上應提供如下信息：

小標簽規(guī)定。如瓶標簽上可利用的空間太小以致于不能包括下述所需全部信息，則5)、6)和7)項的信息可省略或刪除。

1.生產(chǎn)企業(yè)名稱或等同的商標或標志。

2.產(chǎn)品名稱。產(chǎn)品名稱應確保使用者能正確識別產(chǎn)品。

3.批號。

4.規(guī)格。例如：質(zhì)量，體積，復溶后的體積。

5.體外診斷用途。

6.儲存和處置條件。應提供未開封狀態(tài)下保證產(chǎn)品的穩(wěn)定狀態(tài)必需的儲存條件；如與外包裝提供的條件不同，還應提供產(chǎn)品處置所采取的所有其他特殊措施；

7.失效期。應明示規(guī)定儲存條件下的失效期 ，表示方式見外包裝標簽。

8.警告和預防措施。如體外診斷試劑（盒）被認為有危險性（例如：化學，放射性或生物危害性），外包裝應標有適當?shù)木疚ｋU的文字或符號，YY/T 0316的要求適用；對于化學危害，如試劑（盒）沒有隨帶含有適當?shù)奈ｋU和安全性的說明的使用說明，則應在外包裝的標簽上進行說明；適用時，應明示試劑預期為一次性使用。

（九）注冊單元劃分的原則

試劑（盒）的注冊單元應為單一試劑（盒），一個注冊單元可以包括不同的包裝規(guī)格。

（十）出廠檢驗原則

每批試劑（盒）出廠檢驗至少進行以下幾項內(nèi)容：外觀、裝量、試劑空白吸光度或吸光度變化率、準確度、批內(nèi)重復性。

《臨床化學體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評規(guī)范》編制說明

一、編寫目的

2007年《體外診斷試劑注冊管理辦法》（試行）、《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》均已發(fā)布，為了指導和規(guī)范臨床化學體外診斷試劑(盒)產(chǎn)品技術(shù)審評工作，幫助審評人員理解和掌握該類產(chǎn)品的性能、預期用途等內(nèi)容，把握技術(shù)審評工作基本要求和尺度，對產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價；同時也為了指導生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品注冊工作。

二、編寫依據(jù)

本規(guī)范主要依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》、《體外診斷試劑注冊管理辦法》（試行）、《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導原則》、《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》。產(chǎn)品的主要技術(shù)指標參考了《臨床化學體外診斷試劑(盒)通用技術(shù)要求》國家標準的報批稿，在規(guī)范的制訂過程中我們還征求了有關(guān)專家及北京主要生化試劑生產(chǎn)廠家的意見。

三、編寫格式

本規(guī)范正文的編寫大綱主要遵從國家食品藥品監(jiān)督管理局于2005年9月香山會議確定的編寫大綱進行編制。

四、部分內(nèi)容的編寫說明

1、工作原理：因臨床化學試劑盒均在具有分光光度系統(tǒng)的生化分析儀上進行試驗，且試劑（盒）采用的原理如終點法、免疫比濁（透射比濁、散射比濁）、速率法（顯色速率法、紫外速率法）等，很難一一講解全面，經(jīng)專家會討論決定本規(guī)范中僅介紹分光光度原理。

2、分析靈敏度：因目前注冊產(chǎn)品標準中對分析靈敏度的定義不統(tǒng)一，試驗方法及要求千差萬別；同時，臨床專家有建議采用最低檢出限的方法。考慮到國家標準《臨床化學體外診斷試劑(盒)通用技術(shù)要求》（報批稿）即將實施，為便于統(tǒng)一思想，規(guī)范管理，決定還是使用上述標準中推薦的試驗方法。

3、測量精密度：在國家標準《臨床化學體外診斷試劑(盒)通用技術(shù)要求》（報批稿）中沒有明確規(guī)定測量精密度樣品的要求，經(jīng)專家討論會及生產(chǎn)企業(yè)實際驗證決定，試劑（盒）參考范圍為0～X區(qū)間濃度時，使用用高、低兩個水平濃度，試劑（盒）參考范圍為X1～X2區(qū)間濃度時，使用用高、中、低三個水平濃度的控制血清或新鮮人血清測試試劑（盒）進行試驗。

4、準確度：型式試驗時，建議按如下優(yōu)先順序，采用下列方法之一測試試劑（盒）的準確性。相對偏差、回收試驗、比對試驗。

由于出廠檢驗批次多，校準品、質(zhì)控品用量大、費用高，因此建議出廠檢驗時，生產(chǎn)企業(yè)可以選擇型式檢驗方式，或用與選定校準品配套的質(zhì)控品進行準確性實驗，試驗方法自行確定。與選定校準品配套的質(zhì)控品是指校準品、質(zhì)控品為同一生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)，在同一型號儀器上使用的。

5、穩(wěn)定性：在專家討論會上，提出是否增加待機穩(wěn)定性。由于考慮目前還沒有進行驗證試驗，試驗方法還不能確定，待進一步驗證后再實施。